技术介绍
一、目的：保证肾穿组织Masson染色质量
二、责任人：特殊染色技术组人员
三、所需试剂：二甲苯、无水乙醇、95%乙醇、90%乙醇、80%乙醇、70%乙醇、苏木素染液、1%盐酸乙醇、1%伊红染液、三氯化铁、碘化钾、柠檬酸、磷钼酸、碳酸盐、天青石蓝、立春红、酸性复红、固深红、橙黄G、醋酸、甲苯胺/亮绿、蒸馏水、中性树胶
四、染液配方：
4.1天青石蓝染液配方：
硫酸铁铵 10g
蒸馏水 100ml
天青石蓝 1g
加热煮沸3min，冷却后过滤，加甘油28ml备用
4.2 Mayer苏木素精染液配方：
结晶苏木精 4g
碘化钾 0.3g
铵明矾（十二水合硫酸铝铵） 50g
蒸馏水 1000ml
柠檬酸 1g
水合氯醛 75g
加热后使明矾溶解，再加入苏木精，溶解后再加柠檬酸、碘化钾和水合氯醛，摇荡使之完全溶解，呈紫红色，用前过滤。
4.3 染液I配方：
立春红 3.5g
酸性复红 1.5g
固深红 1g
橙黄G 1.65g
蒸馏水 500ml
醋酸 5ml
4.4 染液II配方：5%磷钼酸水溶液
4.5 染液III配方：
甲苯胺蓝/亮绿 2.5g
蒸馏水 100ml
冰醋酸 2ml
五、操作步骤：
5.1染色前检查：核对切片上的病理号和石蜡块编号（用铅笔标记以免染色过程中洗脱），检查切片是否完整？是否有刀痕及裂纹等？
5.2脱蜡：二甲苯溶液I（15min）-二甲苯溶液II（15min）-无水乙醇I（5min）-无水乙醇II（5min）-90%乙醇（5min）-90%乙醇（5min）-80%乙醇（5min）-70%乙醇（5min）-自来水冲洗
5.3苏木素染色：Marry苏木精染液染色（5min）-流水冲洗（1min）
5.4分化：1%盐酸酒精分化（1-3s）-流水冲洗（1min）
5.5染色：浸入染液I（5-10min）
5.6浸入1%醋酸染液洗（1min）
5.7浸入染液II（30s-1min）
5.8浸入染液III（2min）
5.9脱水及透明：70%乙醇（5min）-80%乙醇（5min）-90%乙醇（5min）-95%乙醇（5min）-无水乙醇（5min）-二甲苯（5min）
5.10封片：用中性树胶封片
5.11标记：核对HE切片上的病理号和石蜡块编号，粘贴标签
5.12染色后检查：另一人再次确认病理申请单与标本是否相符，并镜检切片及染色质量
六、结果：细胞核呈红色，免疫复合物呈红色，基底膜呈浅蓝色，III型胶原纤维呈蓝色或绿色。
七、质控：
7.1染色前，认真评价切片质量，包括切片厚度（2-3um），是否有刀痕、是否有裂纹等。
7.2新配制和新购置染色，需进行预染以保证染色效果。
7.3每次染色前需进行预染，保证染色当天染液质量，以便及时更换。
7.4认真做到染色前后核对染色申请单与石蜡块编号，发现问题及时查找原因并进行记录。
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