肾穿刺组织过碘酸六胺银（PASM）染色_特色医疗技术_病理科_医技及平台科室_科室设置

实施案例

一、目的：保证肾穿组织PASM染色质量

二、责任人：特殊染色技术组人员

三、所需试剂：二甲苯、无水乙醇、95%乙醇、90%乙醇、80%乙醇、70%乙醇、1%过碘酸水溶液、Schiff试剂、1%亚硫酸氢钠、六胺银染液、Harris苏木精染液、1%盐酸乙醇、蒸馏水、中性树胶

四、染液配方：

4.1 六胺银试剂配方：

2%硝酸银水溶液 3ml

3%六亚甲基四胺银液 25ml

5%硼砂溶液 2ml

4.2Harris苏木精染液配方：

苏木精 1g

无水乙醇 10ml

十二水合硫酸铝钾 20g

蒸馏水 200ml

氯化汞 0.5g

五、操作步骤：

5.1染色前检查：核对切片上的病理号和石蜡块编号（用铅笔标记以免染色过程中洗脱），检查切片是否完整？是否有刀痕及裂纹等？

5.2脱蜡：二甲苯溶液I（15min）-二甲苯溶液II（15min）-无水乙醇I（5min）-无水乙醇II（5min）-90%乙醇（5min）-90%乙醇（5min）-80%乙醇（5min）-70%乙醇（5min）-自来水冲洗

5.3脱贡：1%过碘酸水溶液染色（10min），自来水冲洗（2min），蒸馏水浸泡（1min）

5.4脱碘：5%硫代硫酸钠（5min），自来水冲洗（2min），蒸馏水浸泡（1min）

5.5银染：浸入55-60℃的六胺银溶液（20min），镜检直至基底膜变黑为止，蒸馏水洗

5.6 5%硫代硫酸钠（5min），蒸馏水洗

5.7 HE复染细胞：苏木精染液染色-分化-伊红染色

5.8脱水及透明：70%乙醇（5min）-80%乙醇（5min）-90%乙醇（5min）-95%乙醇（5min）-无水乙醇（5min）-二甲苯（5min）

5.9封片：用中性树胶封片

5.10标记：核对PAS切片上的病理号和石蜡块编号，粘贴标签

5.11染色后检查：另一人再次确认病理申请单与标本是否相符，并镜检切片及染色质量

六、结果：肾小球、肾小管和肾血管的基底膜、网状纤维和IV型胶原纤维呈黑色，细胞核呈蓝黑色，背景呈粉红色。

七、质控：

7.1染色前，认真评价切片质量，包括切片厚度（2-3um），是否有刀痕？是否有裂纹等？

7.2新配制和新购置染色，需进行预染以保证染色效果

7.3每次染色前需进行预染，保证染色当天染液质量，以便及时更换

7.4认真做到染色前后核对染色申请单与石蜡块编号，发现问题及时查找原因并进行记录