肾穿刺组织刚果红染色
时间:2021-01-13 浏览量:0

实施案例

一、目的:保证肾穿组织刚果红染色质量

二、责任人:特殊染色技术组人员

三、所需试剂:二甲苯、无水乙醇、95%乙醇、90%乙醇、80%乙醇、70%乙醇、刚果红、氢氧化钠、氯化钠、蒸馏水、中性树胶

四、染液配方:

4.1刚果红储存液配方:

    刚果红                0.3g

    氯化钠                0.3g

    80%乙醇               100ml

4.2 1%碱性分离液:

    氢氧化钠              1g

    蒸馏水                100ml

4.3刚果红工作液配方(配制后20min内使用):

1%碱性分离液          0.5ml

刚果红储存液           50ml

4.4碱性酒精溶液:

    1%碱性分离液           1ml

    50%乙醇                100ml

五、操作步骤:

5.1染色前检查:核对切片上的病理号和石蜡块编号(用铅笔标记以免染色过程中洗脱),检查切片是否完整?是否有刀痕及裂纹等?

5.2脱蜡:二甲苯溶液I(15min)-二甲苯溶液II(15min)-无水乙醇I(5min)-无水乙醇II(5min)-90%乙醇(5min)-90%乙醇(5min)-80%乙醇(5min)-70%乙醇(5min)-自来水冲洗

5.3刚果红染色:刚果红工作液(10min)-流水冲洗(1min)

5.4分化:碱性乙醇分化(1-3s)-流水冲洗(1min)

5.5苏木素染色:苏木精染液染色(2min)-流水冲洗(1min)

5.6脱水及透明:70%乙醇(5min)-80%乙醇(5min)-90%乙醇(5min)-95%乙醇(5min)-无水乙醇(5min)-二甲苯(5min)

5.7封片:用中性树胶封片

5.8标记:核对HE切片上的病理号和石蜡块编号,粘贴标签

5.9染色后检查:另一人再次确认病理申请单与标本是否相符,并镜检切片及染色质量

六、结果:细胞核呈紫蓝色,细胞质、基底膜、胶原纤维、肌纤维呈粉红色,淀粉样物质呈砖红色。

七、质控:

7.1染色前,认真评价切片质量,包括切片厚度(2-3um),是否有刀痕?是否有裂纹等?

7.2新配制和新购置染色,需进行预染以保证染色效果

7.3每次染色前需进行预染,保证染色当天染液质量,以便及时更换

7.4认真做到染色前后核对染色申请单与石蜡块编号,发现问题及时查找原因并进行记录